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N-甲酰甲硫氨酸（N-Formylmethionine，简写为fMet）是一种存在于细菌及相关的真核生物细胞器中的蛋白氨基酸。它是氨基酸甲硫氨酸的衍生物，其中一个甲酸基被加到原甲硫氨酸的氨基上。他专门用于蛋白质合成的起始阶段，之后它可被移除。

N-甲酰甲硫氨酸在细菌、线粒体和叶绿体的蛋白质生物合成中起到至关重要的角色。但它并不用于真核生物胞质溶胶中的蛋白质生物合成，真核细胞的细胞溶质中只有核基因被翻译。它亦不被用于古菌中。在人体中，N-甲酰甲硫氨酸会被免疫系统识别为外源性物质并刺激机体对抗潜在感染。

N-甲酰甲硫氨酸是原核生物蛋白质合成中的起始残基，因此它位于生长中多肽的N-端。N-甲酰甲硫氨酸被一种特殊的转运RNA（tRNA.fMet）递交到核糖体（30S）-信使RNA复合体上，这种特殊的tRNA具有3'-UAC-5'反密码子可以结合到位于信使RNA上的5'-AUG-3'起始密码子上。

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